بررسی و شناسایی ژن(های) کاندید تجدید کننده باروری در سیستم نرعقیمی سیتوپلاسمی wa برنج

سیستم نرعقیمی wa یک نوع ایده آل از cms اسپوروفیتیک برنج ایندیکا می باشد که در 90 درصد موارد از آن برای تولید بذور هیبرید استفاده می شود. در تحقیقات قبلی ژن rf4 تجدید کننده باروری در یک قطعه 206kb حاوی 5 ژن به عنوان محتمل ترین ژن های کاندید تجدید کننده باروری برای rf4 احاطه شده بین دو مارکر rm6737 وab443 واقع بر کروموزوم 10 ردیابی و تشخیص داده شده بود. ژنهای کاندید مذکور واقع در این منطقه همگی جزء کلاس ppr پروتئین ها هستند و دارای پپتید های میتوکندریایی در n ترمینال خود می باشند . برای شناسایی این ژن از میان ژنهای کاندیدای احتمالی، از روش بررسی بیان ژن که شامل استخراج rna و rt-pcr می باشد استفاده گردید و با توجه به توالی آنها 5 جفت پرایمر برای این ژن ها طراحی و تولید گردید. برای تولید بافت گیاهی مورد نیاز بذر ارقام بارور و استریل مورد نظر در مزرعه ای در پردیس دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی کشت گردید و در مراحل مختلف نمونه برداری صورت گرفت. از نمونه های حاصل rna استخراج گردید و cdna آن تهیه شد و در نهایت بیان این ژن ها در مراحل مختلف رشد گیاه شامل مراحل گیاهچه، پنجه زنی و خوشه دهی در ارقام ir24 (رقم تجدید کننده باروری حامل مکان ژنیrf4) و رقم ir68897-a (رقم نرعقیم) توسط روش rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت با مقایسه نتایج تحقیقات قبلی و تحقیق حاضر از میان ژن های کاندید دو ژن osifcd036677 و rf-1b به دلیل نحوه بیانشان به عنوان محتمل ترین ژن های عامل باروری در سیستم نرعقیمی wa در نظر گرفته شدند.